目的: 分离培养和鉴定大鼠骨髓间充质干细胞。方法: 分离SD青年大鼠股骨,L-DMEM冲洗骨髓腔,制备细胞悬液接种培养,消化传代纯化细胞。传代的骨髓间充质干细胞进行增殖曲线、克隆形成能力测定,用免疫组化检测增殖细胞vimentin、laminin的表达。结果: 传代的细胞在培养第1~2天为潜伏期,第3~6天是细胞快速增殖期,第6天达高峰,第9天后速度减慢,进入平台期,并且随传代次数的增加,细胞增殖速度逐渐下降。随传代次数增多,克隆形成能力逐渐下降。第5代以后细胞基本纯化为骨髓间充质干细胞,细胞呈长梭形。免疫组化检测增殖细胞vimentin表达阳性、laminin表达阴性。结论: 本实验方法能有效扩增大鼠骨髓间充质干细胞,而且简单易行。

目的：利用荧光金逆行标记评价视神经切断后视网膜节细胞(RGCs)的存活率。方法：将SD大鼠20只随机均分为4组,正常对照组和视神经切断后5 d、7 d和14 d组。用荧光金逆行标记和定量解剖学技术观察正常对照组和视神经切断后5 d、7 d和14 d组RGCs的密度。结果:正常对照组RGCs呈放射状分布,边界清晰,可见明显细胞突起,无渗漏现象;视神经切断组RGCs随时间延长而减少,细胞分布不均匀,并且可见吞噬死亡细胞碎片和从死亡细胞渗漏的荧光金的小胶质细胞。正常对照组左眼与右眼RGCs密度差异无统计学意义(P0.05);视神经切断后RGCs进行性减少,切断后5 d、7 d和14 d组左眼RGCs密度均明显低于正常对照组(P0.01),视神经切断后5 d、7 d和14 d存活率分别为53%、38%和13%。结论：荧光金逆行标记是评价视神经切断后RGCs存活率有效的方法。

目的:探讨新生大鼠视网膜干细胞的分离培养及其生物学特性。方法:采用机械酶-分离法体外扩增培养SD大鼠视网膜干细胞,观测细胞增殖能力,绘制CCK-8检测生长曲线;诱导细胞分化,免疫组织化学检测细胞巢蛋白、溴脱氧尿核苷、微管缔合蛋白-2、神经胶质原纤维酸性蛋白、胸腺糖蛋白1.1的表达。结果:原代视网膜干细胞形成大量的细胞球悬浮生长,传代后的细胞也可以形成细胞球,呈线性生长,巢蛋白和溴脱氧尿核苷表达阳性;诱导分化后的细胞部分原纤维酸性蛋白、微管缔合蛋白-2、胸腺糖蛋白1.1表达阳性。结论:新生SD大鼠视网膜干细胞可在体外分离培养和扩增,表达干细胞特性,并可向视网膜节细胞分化。

目的通过探讨重组人内抑素（rhEndostatin）促进兔耳增生性瘢痕成纤维细胞（HSFs）凋亡的部分机制，为临床上药物治疗增生性瘢痕（HS）提供实验依据。方法取新西兰大耳兔6只制备瘢痕模型。以HSFs为研究对象，应用激光共聚焦显微镜（CLSM）结合Fluo-4/AM（Ca²⁺荧光指示剂）检测在Hanks与D-Hanks液中（有、无细胞外钙）rhEndostatin（100 μg/mL）对HSFs胞内Ca²⁺浓度（[Ca²⁺]i）的影响。结果当细胞外液为Hanks液时，rhEndostatin（100 μg/mL）可使HSF胞质内[Ca²⁺]i水平持续增加，当持续10 s给予rhEndostatin处理后，HSFs胞内[Ca²⁺]i可迅速增加达峰顶再缓慢下降，在停止药物处理后，HSFs胞内[Ca²⁺]i继续下降，停止处理约50 s后，胞内[Ca²⁺]i尚未至基线水平；而当细胞处于D-Hanks液中时，rhEndostatin对HSFs胞质内[Ca²⁺]i无明显影响。结论rhEndostatin可通过干扰HSFs胞内钙离子稳态，推动胞外Ca²⁺内流导致胞内钙超载来诱导HSFs凋亡。

目的探讨电压门控钠离子通道β4亚基（SCN4B/β4）在鼻咽癌组织中的表达，并分析其临床意义。方法应用免疫组织化学Elivision^TM Plus法检测90例鼻咽癌病人鼻咽部活检标本和20份存档的石蜡包埋正常鼻咽黏膜组织（主要为鼻咽黏膜慢性炎）标本的SCN4B/β4表达情况，分析SCN4B/β4的阳性表达与鼻咽癌病人临床病理特征的关系。结果鼻咽癌病人SCN4B/β4蛋白表达率低于正常鼻咽黏膜组织病人（P < 0.01）；SCN4B/β4蛋白表达在不同T分期、N分期、M分期、临床分期差异有统计学意义（P < 0.05~P < 0.01），T₁~T₂期、M₀期、Ⅰ~Ⅱ期SCN4B/β4蛋白高表达率高于T₃~T₄分期、M₁分期和Ⅲ~Ⅳ期，随N分期增加，SCN4B/β4蛋白高表达率下降；SCN4B/β4高表达5年生存率为85.2%，高于SCN4B/β4低表达的60.3%（P < 0.05）。结论鼻咽癌组织的SCN4B/β4蛋白高表达与淋巴结和远处转移呈负相关，SCN4B/β4高表达病人生存率较高。

目的观察骨桥蛋白（OPN）、环氧合酶-2（COX-2）在宫颈癌组织中的表达，并分析两者与化疗敏感性的相关性。方法157例行新辅助化疗（NACT）治疗宫颈癌病人，根据相关肿瘤疗效评价标准分为化疗敏感组（112例）和化疗不敏感组（45例）。采用RT-PCR、Western blotting法检测2组病人NACT治疗前后OPN、COX-2 mRNA和蛋白表达水平，分析治疗前宫颈癌组织OPN、COX-2 mRNA表达水平与血管形成指数（VI）、血流指数（FI）、血管血流指数（VFI）等超声相关参数的关系，采用logistic回归法对影响宫颈癌病人化疗敏感性的多因素进行分析。结果化疗不敏感组治疗前OPN、COX-2 mRNA和蛋白表达水平明显高于化疗敏感组（P < 0.01），化疗不敏感组治疗后OPN、COX-2 mRNA和蛋白表达水平未出现明显改变（P>0.05），而化疗敏感组治疗后OPN、COX-2 mRNA和蛋白表达水平明显降低（P < 0.01）；治疗前宫颈癌组织OPN、COX-2 mRNA表达水平与VI、FI均呈正相关性关系（P < 0.05），而与VFI无明显相关性关系（P>0.05）；化疗前宫颈癌组织OPN、COX-2 mRNA表达水平及VI、FI为影响化疗敏感性的独立危险因素（P < 0.05）。结论宫颈癌组织中OPN、COX-2 mRNA和蛋白均呈高表达状态，且两者与化疗敏感性之间存在密切的联系。